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wccbb木蟲 (著名寫手)
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[求助]
內(nèi)標(biāo)法加入量的問題 謝謝 已有1人參與
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各位大俠: 做組織分布實(shí)驗(yàn),采用內(nèi)標(biāo)法計(jì)算?瞻最A(yù)實(shí)驗(yàn)得到10ul(50ug/ml)【這個(gè)濃度差不多是標(biāo)準(zhǔn)曲線上面100%的點(diǎn)濃度】的藥物與10ul(10ug/ml)內(nèi)標(biāo)經(jīng)過樣品處理后進(jìn)樣的峰面積 二者相接近。我想請教一下,我認(rèn)為內(nèi)標(biāo)的加入量應(yīng)該本著A藥/A內(nèi)=1,即藥物和內(nèi)標(biāo)的響應(yīng)值相接近,但是有的文獻(xiàn)介紹是二者濃度相接近為原則,不知道哪個(gè)正確?還有 藥物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值,有沒有必須小于1的說法,還是大于1也可以?我預(yù)實(shí)驗(yàn)的絕對回收率大概是60%多,是否可以,我看論文中都寫80%多,不知道怎么做的?最后一個(gè)問題:含有內(nèi)標(biāo)的方法中,絕對回收率和相對回收率怎么計(jì)算?非常感謝! |
金蟲 (正式寫手)
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內(nèi)標(biāo)的濃度沒有嚴(yán)格的要求。 做生物樣品分析的時(shí)候,一般習(xí)慣內(nèi)標(biāo)峰面積控制在你標(biāo)曲ULOQ化合物峰面積的50%左右,只要質(zhì)譜的響應(yīng)比較穩(wěn)定即可。 樣品前處理后,一般絕對回收率要求在80%以上,認(rèn)為方法較好。 但是只要控制你低中高濃度的回收率CV不是很大,你的方法也是可行的。 絕對回收率是用峰面積比值來算,對照組沒有提取過程,其他保持一致。 相對回收率是用ratio計(jì)算。 |

木蟲 (著名寫手)
金蟲 (正式寫手)

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