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wo的海寶圓圓

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[交流] 梯度洗脫還有等度洗脫~還有電信號(hào)強(qiáng)弱問(wèn)題

我測(cè)量的六種膽鹽~參照一篇外文文獻(xiàn)，人家用的兩種流動(dòng)相都是乙腈和水混合物還都加了離子對(duì)試劑。。。這樣做的話電信號(hào)強(qiáng)度很大，但是基線一直沖不平，單樣品分析的時(shí)候還基線漂移特別嚴(yán)重，于是在請(qǐng)教了老師之后，我把流動(dòng)相改成了一個(gè)純乙腈，一個(gè)加了離子對(duì)試劑的水溶液，相對(duì)應(yīng)的梯度變換也改了，但是感覺(jué)用標(biāo)品做的信號(hào)強(qiáng)度沒(méi)之前峰高了，而且換了兩相后，梯度變化就不太明顯，只變了百分之十幾~我有兩個(gè)問(wèn)題：
第一，變化這么小，我要不改成出峰開(kāi)始的比例直接跑等度可以么
第二，電信號(hào)強(qiáng)弱影響我的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不，據(jù)我?guī)熃愀嬖V我說(shuō)沒(méi)關(guān)系，說(shuō)只要根據(jù)這些數(shù)據(jù)把標(biāo)準(zhǔn)曲線做出來(lái)，對(duì)應(yīng)的找著濃度就可以了，是這樣的么
希望懂的蟲(chóng)友給予幫忙，謝謝

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1樓 2014-10-25 15:27:14

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archbishop

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7樓: Originally posted by wo的海寶圓圓 at 2014-10-25 21:40:00
昨天用215nm試了一下，都沒(méi)有在200nm下的峰面積大~就是甘氨膽酸鈉，牛黃膽酸鈉，還有類(lèi)似的物質(zhì)~...

我覺(jué)得你可能需要做衍生，或者用質(zhì)譜測(cè)。如果是用離子對(duì)試劑的話只能長(zhǎng)時(shí)間平衡直到基線平穩(wěn)，再就是注意別讓鹽析出。

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雲(yún)幕低垂映桂子，江月留白問(wèn)柳心。

8樓2014-10-25 21:56:43

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archbishop

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wo的海寶圓圓: 金幣+3 2014-11-24 18:34:57

大部分情況下梯度洗脫都比等度洗脫響應(yīng)高，幾十倍甚至上百倍的我都見(jiàn)過(guò)。但是假如響應(yīng)能夠滿(mǎn)足檢測(cè)需求也沒(méi)必要追求太高的響應(yīng)，也就是定量限的響應(yīng)足夠就行。
還有，不建議分開(kāi)水相和有機(jī)相，因?yàn)檫@樣流動(dòng)相在儀器內(nèi)部混合的時(shí)候離子對(duì)試劑可能會(huì)析出，文獻(xiàn)上兩個(gè)流動(dòng)相都含有水相和有機(jī)相并且加入離子對(duì)試劑是常用的模式。

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2樓2014-10-25 19:03:57

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引用回帖:

2樓: Originally posted by archbishop at 2014-10-25 19:03:57
大部分情況下梯度洗脫都比等度洗脫響應(yīng)高，幾十倍甚至上百倍的我都見(jiàn)過(guò)。但是假如響應(yīng)能夠滿(mǎn)足檢測(cè)需求也沒(méi)必要追求太高的響應(yīng)，也就是定量限的響應(yīng)足夠就行。
還有，不建議分開(kāi)水相和有機(jī)相，因?yàn)檫@樣流動(dòng)相在儀器 ...

上次用了這兩個(gè)鹽溶液，基線一直跑不平。。。根本沒(méi)法進(jìn)樣，什么情況，請(qǐng)問(wèn)該如何調(diào)整，而且到后來(lái)沖柱子一直沖不平，我的波長(zhǎng)是200nm，是不是波長(zhǎng)太短的原因啊~我的梯度洗脫是其中一相30min內(nèi)從10%升到了70%，基線漂移特別嚴(yán)重。。。哎，就是因?yàn)檫@樣，我才想辦法進(jìn)行調(diào)整的，可是峰的響應(yīng)面積明顯沒(méi)有以前的大了~

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3樓2014-10-25 19:35:29

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wo的海寶圓圓(費(fèi)姚永芬代發(fā)): 金幣+3 2014-10-27 10:34:06

引用回帖:

3樓: Originally posted by wo的海寶圓圓 at 2014-10-25 19:35:29
上次用了這兩個(gè)鹽溶液，基線一直跑不平。。。根本沒(méi)法進(jìn)樣，什么情況，請(qǐng)問(wèn)該如何調(diào)整，而且到后來(lái)沖柱子一直沖不平，我的波長(zhǎng)是200nm，是不是波長(zhǎng)太短的原因啊~我的梯度洗脫是其中一相30min內(nèi)從10%升到了70%，基線 ...

梯度洗脫基線肯定會(huì)漂。波長(zhǎng)的確挺短，你測(cè)的物質(zhì)不會(huì)是那種紫外吸收很弱的吧？

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4樓2014-10-25 20:03:17

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