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Charlie2013_

銀蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 468
散金: 5
帖子: 117
在線: 34.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2852203
注冊(cè): 2013-12-06
專業(yè): 果樹(shù)學(xué)

[求助] 問(wèn)一個(gè)有關(guān)設(shè)計(jì)PCR優(yōu)化體系實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題

初次接觸分子，如果一下用詞有誤，請(qǐng)勿噴。。。
還請(qǐng)多多指教
正題，想設(shè)計(jì)一個(gè)優(yōu)化EST-PCR體系的正交試驗(yàn)
問(wèn)題1：先確定反應(yīng)體系各組分用量？還是先確定各組分濃度？
在查閱的文章中，一般都是先設(shè)計(jì)(篩選最優(yōu)的) 各組分濃度的正交試驗(yàn)。那各部分用量怎么確定？一般都沒(méi)有說(shuō)明，隨便確定一個(gè)還是怎樣。于是我糊涂了。。。。囧

問(wèn)題2：如果先設(shè)計(jì)濃度的試驗(yàn)，之后需要分別設(shè)計(jì)用量的實(shí)驗(yàn)嗎？
例如：A*B，B*C...E*A，這A~E 5個(gè)因素彼此的用量~

問(wèn)題3：（小白問(wèn)題）諸如Mg離子濃度（1.5mM/L）、dNTP濃度(2.5mM/L)、引物濃度(0.1~0.5mM/L)和TaqDNA聚合酶濃度（5U/μL），是它們?cè)诋?dāng)下反應(yīng)體系中的濃度嗎？
1.5mM/L 和1.5mM/μL 哪個(gè)對(duì)��？？？？
系不系從試劑公司買(mǎi)回來(lái)的，需要自己最后稀釋還是？？？完全懵懵的狀態(tài)~~~~
TAT

回復(fù)此樓

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1樓 2014-10-25 18:06:01

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

智能機(jī)器人

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