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紫色的風(fēng)銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
大腸桿菌電轉(zhuǎn)化
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請(qǐng)教 1、大腸桿菌電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，怎樣制備？用甘油或者冰水清洗？ 2、怎樣保存？ 3、怎樣調(diào)控感受態(tài)濃度？ 4、電轉(zhuǎn)的時(shí)候感受態(tài)體積與電轉(zhuǎn)杯的規(guī)格有什么要求？ 謝謝 |
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hemigu
銀蟲(chóng) (初入文壇)
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- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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圖片里給出了電轉(zhuǎn)感受態(tài)的制備方法。我們一般用的是冰的滅菌超純水洗兩次之后，最后一次再用10%的甘油洗。離心的轉(zhuǎn)數(shù)和時(shí)間可以調(diào)整。 濃度的話(huà)，一般用你做好的感受態(tài)，測(cè)OD值，然后涂平板計(jì)數(shù)，確定一下1OD大概有多少個(gè)菌，然后再把濃度調(diào)整到我給的圖片里要求的濃度范圍內(nèi)。 保存的話(huà)，用液氮速凍之后，放在-78度冰箱里就可以了。 至于點(diǎn)轉(zhuǎn)杯規(guī)格，一般我們用的是0.1cm的杯子，100uL的感受態(tài)�？梢愿鶕�(jù)電轉(zhuǎn)儀說(shuō)明書(shū)上面的要求調(diào)整。 1.jpg 2.jpg |
2樓2016-01-27 16:42:26
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