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準(zhǔn)博士

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

應(yīng)助: 2 (幼兒園)
金幣: 4327.2
散金: 286
紅花: 3
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在線: 118小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 548127
注冊(cè): 2008-04-18
性別: MM
專業(yè): 生物化工與食品化工

[求助] 請(qǐng)教萃取內(nèi)標(biāo)法！

According to the manuscript, the authors have analyzed the products of their bioconversion experiments after liquid-liquid extraction with ethyl acetate. However, there is no indication of the usage of an internal standard (such as progesterone, for example). According to my experience, this is a serious flaw. Typically, there is a significant variation in extraction efficiency from sample to sample, even if there is no change in the composition of the biotransformation media. This effect was neglected by the authors.

以上是審稿人提的意見(jiàn)。我先描述一下我的實(shí)驗(yàn)：我做得是微生物轉(zhuǎn)化甾體化合物，轉(zhuǎn)化結(jié)束，采用乙酸乙酯萃取，然后旋光儀蒸干，接著用乙腈溶解，上液相，分析最終產(chǎn)物、底物和副產(chǎn)物。本身覺(jué)得應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題，但因?yàn)榉蛛x提取沒(méi)系統(tǒng)研究過(guò)，審稿人的建議看不懂。請(qǐng)高人解釋。

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1樓 2014-11-21 15:25:46

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銅蟲(chóng) (職業(yè)作家)

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準(zhǔn)博士: 金幣+20, 博學(xué)EPI+1, ★★★很有幫助 2015-01-02 19:35:08

大概了解審稿人的想法，他的意思是指即使你的biotransformation media都是一樣的話(assume轉(zhuǎn)化的結(jié)果都相同)，但是每一批樣品間在經(jīng)過(guò)液液萃取后，其萃取效率都會(huì)有差別(there is a significant variation in extraction efficiency from sample to sample)，造成你最后上液相后得到的產(chǎn)物與副產(chǎn)物會(huì)有一點(diǎn)差距，這是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)條件變異造成的誤差，故應(yīng)在萃取前加入內(nèi)標(biāo)物，即使萃曲效率有些微變化，但分析物與內(nèi)標(biāo)物變化的比例是相同的，萃取造成的變異才會(huì)降到最低。
請(qǐng)參考看看。

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2樓2014-11-21 16:53:38

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