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kstage新蟲 (初入文壇)
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[求助]
革蘭氏陽(yáng)性菌超聲破碎
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| 最近提陽(yáng)性菌的膜蛋白,需要超聲破碎,看文獻(xiàn)報(bào)道都是限定振幅,但實(shí)驗(yàn)的超聲破碎儀只有功率,所以大概摸索前進(jìn)還好。比較疑問(wèn)的是,文獻(xiàn)說(shuō)明“three bursts, 30 s each at an amplitude of 18 mm”,我的理解是超聲15s 停15s ,3個(gè)循環(huán)。之前看大腸桿菌破碎一般都是10s/10s,大概進(jìn)行20min。覺著差異比較大,雖然我提取的是膜蛋白,超聲的目的大概也是要把細(xì)菌敲成碎片,至少能把細(xì)胞壁破碎才能見膜,細(xì)胞壁能碎,膜估計(jì)也能碎,菌體內(nèi)容物也就出來(lái)了,覺著提取過(guò)程和大腸桿菌提取蛋白差別不大。也有可能我文獻(xiàn)理解錯(cuò)誤,求各位大神指導(dǎo),謝謝! |
新蟲 (初入文壇)
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請(qǐng)問(wèn)樓主還有膜蛋白提取方法嗎,能否指點(diǎn)我一下,想要提取已高表達(dá)的外膜蛋白,但是最終沒(méi)有提取出來(lái),請(qǐng)問(wèn)樓主當(dāng)時(shí)有去除內(nèi)膜這一步驟嗎 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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