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kstage新蟲 (初入文壇)
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[求助]
革蘭氏陽性菌超聲破碎
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| 最近提陽性菌的膜蛋白，需要超聲破碎，看文獻(xiàn)報道都是限定振幅，但實驗的超聲破碎儀只有功率，所以大概摸索前進(jìn)還好。比較疑問的是，文獻(xiàn)說明“three bursts, 30 s each at an amplitude of 18 mm”，我的理解是超聲15s 停15s ，3個循環(huán)。之前看大腸桿菌破碎一般都是10s/10s，大概進(jìn)行20min。覺著差異比較大，雖然我提取的是膜蛋白，超聲的目的大概也是要把細(xì)菌敲成碎片，至少能把細(xì)胞壁破碎才能見膜，細(xì)胞壁能碎，膜估計也能碎，菌體內(nèi)容物也就出來了，覺著提取過程和大腸桿菌提取蛋白差別不大。也有可能我文獻(xiàn)理解錯誤，求各位大神指導(dǎo)，謝謝！ |
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米線油
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
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請問樓主還有膜蛋白提取方法嗎，能否指點我一下，想要提取已高表達(dá)的外膜蛋白，但是最終沒有提取出來，請問樓主當(dāng)時有去除內(nèi)膜這一步驟嗎 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2020-06-14 17:54:44
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