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ggyy0911鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
懷疑提質(zhì)粒時(shí)提到了雜菌的質(zhì)粒，求大家給幫著分析分析 已有2人參與
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第一次提質(zhì)粒之后跑了電泳，重組質(zhì)粒應(yīng)該是7000，沒(méi)線性化跑的時(shí)候4000那有非常亮的條帶，但是7000那只有隱隱約約的條帶，而且某些樣品點(diǎn)樣孔發(fā)亮。雖然沒(méi)線性化看不出實(shí)際大小，但大小是差不多的，不會(huì)相差3000bp這么多。我用的質(zhì)粒是pEASY Blunt Simple，空質(zhì)粒就是4000. 隨后我用通用引物，以質(zhì)粒為模板跑了PCR，都跑出了3000的目的條帶，詭異的是某些樣品點(diǎn)樣孔依然發(fā)亮。第一次跑PCR產(chǎn)物有這種情況。 然后我又用EcoRI和NotI雙酶切過(guò)夜，跑了電泳，能切出兩條帶，并且大小相符。而且沒(méi)有雜帶…… 我以為是我提質(zhì)粒提不好，又認(rèn)真的提了一次，還是和第一次一樣，4000那非常亮，7000（也就是重組質(zhì)粒應(yīng)該在的地方）反而只有隱約的條帶。 當(dāng)時(shí)覺(jué)得結(jié)果不好都沒(méi)留圖，煩大家看文字吧。 |
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2樓2014-12-08 18:26:06
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