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安小安4302鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
pET系列的質(zhì)粒怎么提？？？ 已有10人參與
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| 最近在提質(zhì)粒，用生工試劑盒，但是pET這個(gè)載體提出的量很少，怎么辦？？增加了菌量還是不行，同時(shí)提的pUCm-T就很好。求大家給點(diǎn)意見�。�！ |
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12樓2014-04-16 10:52:50
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
安小安4302(kx444555代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)交流 2014-04-15 09:02:03
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| 既然樓主同時(shí)提取克隆載體質(zhì)粒沒問題，說明問題不是出在質(zhì)粒提取步驟，應(yīng)該考慮質(zhì)粒或菌株差異。樓主所用pET系列載體是卡那霉素抗性吧？pUCm-T是氨芐抗性，所以建議檢查你所用的卡那霉素是否時(shí)間過長失效導(dǎo)致所培養(yǎng)的菌不純？建議考慮一下這個(gè)因素。另外樓主這兩個(gè)菌株用的都是克隆菌株吧？如果從表達(dá)菌株中提取pET系列載體，出現(xiàn)這種情況不奇怪。 |
6樓2014-04-14 21:29:54
紫風(fēng)鈴?fù)愣?/font>
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7樓2014-04-14 21:31:09
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8樓2014-04-14 22:05:07
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10樓2014-04-15 09:26:00
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