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安小安4302鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
pET系列的質(zhì)粒怎么提??? 已有10人參與
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| 最近在提質(zhì)粒,用生工試劑盒,但是pET這個(gè)載體提出的量很少,怎么辦??增加了菌量還是不行,同時(shí)提的pUCm-T就很好。求大家給點(diǎn)意見!! |

銅蟲 (小有名氣)

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金蟲 (小有名氣)
| 既然樓主同時(shí)提取克隆載體質(zhì)粒沒問題,說明問題不是出在質(zhì)粒提取步驟,應(yīng)該考慮質(zhì);蚓瓴町悺侵魉胮ET系列載體是卡那霉素抗性吧?pUCm-T是氨芐抗性,所以建議檢查你所用的卡那霉素是否時(shí)間過長失效導(dǎo)致所培養(yǎng)的菌不純?建議考慮一下這個(gè)因素。另外樓主這兩個(gè)菌株用的都是克隆菌株吧?如果從表達(dá)菌株中提取pET系列載體,出現(xiàn)這種情況不奇怪。 |

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