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七小艾

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[求助] SDS-PAGE總蛋白上樣量已有6人參與

SDS-PAGE總蛋白，上樣量多少合適呀？10孔的伯樂的蛋白膠，上樣體積最大可以達到多少？

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1樓 2014-12-09 08:47:03

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lpzl

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七小艾: 金幣+2, ★有幫助 2014-12-13 19:49:00

理論上可以上樣最大38ul 吧。。。一般上樣10-15ul 比較好。。我就是這么做的

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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...

2樓2014-12-09 09:52:55

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wlt728

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七小艾: 金幣+2, ★有幫助 2014-12-13 19:49:13

上樣體積的話，5-20μl都可以，只要你的樣品不漂出來污染別的泳道就可以！不過你上多大的體積，其實還是要看你上樣的蛋白量，不要太多，那樣會把泳道撐開，太少反正看不清蛋白！考染可以多上些蛋白！

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I am not a hero , but I served with heroes！

3樓2014-12-09 20:12:10

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七小艾: 金幣+2, ★有幫助 2014-12-13 19:49:29

多大尺寸的梳子齒決定可以上樣多大的樣品體積。另外，你可以自己做膠或別人做膠跑之前拔掉梳子之后，加水看看能加多少。

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流星來時我許了個愿，愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復(fù)發(fā)帖和僅把論壇當(dāng)解決問題工具，久不看論壇一來就提問者，寧棄EPI和VIP也不回帖。

4樓2014-12-10 01:22:05

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enzyming

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七小艾: 金幣+2 2014-12-13 19:49:39

你可以加到100微升�。�！不用擔(dān)心，多加幾次。

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5樓2014-12-10 02:53:37

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七小艾: 金幣+2 2014-12-13 19:49:47

40 μl，再多就容易溢到旁邊的孔。

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6樓2014-12-10 08:36:36

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zhang001zh

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看梳孔大小吧我一般用2-20ul 不用太多個人喜歡上10ug蛋白

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7樓2014-12-10 16:41:31

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陶然悅

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5樓: Originally posted by enzyming at 2014-12-10 02:53:37
你可以加到100微升�。�！不用擔(dān)心，多加幾次。

怎么多加幾次？

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8樓2014-12-12 18:07:55

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引用回帖:

8樓: Originally posted by 陶然悅 at 2014-12-12 18:07:55
怎么多加幾次？
...

跑一會停一下再加。好好掌握火候啊

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9樓2014-12-13 05:35:16

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謝謝大家了，嘗試了一下，膠做的好的話大概能上20ul~~

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10樓2014-12-13 19:48:41

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