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求助蛋白復(fù)性透析問(wèn)題····· 已有2人參與
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求助啊。。。。 LZ我已經(jīng)看了很多關(guān)于變性復(fù)性透析的帖子，但是還是有一些解決不了的問(wèn)題，不明白，不知道怎么辦，所以來(lái)求助萬(wàn)能的蟲(chóng)子們了。 我是8m尿素變性，2m尿素復(fù)性，稀釋復(fù)性，就是把變性液一滴一滴往復(fù)性液里加。蛋白變性之后，濃度在10mg/ml左右，復(fù)性后在0.2-0.4mg/ml左右，那么問(wèn)題來(lái)了： 1.復(fù)性之后，蛋白復(fù)性液中總是有顆粒轉(zhuǎn)，纖維狀的物體，但是離心離不下來(lái)，整體看復(fù)性液還透明清澈，就像里面有毛毛的感覺(jué)，怎么離心都沒(méi)用。 2.然后透析，用pbs透析，復(fù)性液ph在9.0，pbs沒(méi)調(diào)ph，應(yīng)該7.5左右吧，透析過(guò)程中沒(méi)見(jiàn)明顯沉淀，但是透析兩天后換了3次液，透析過(guò)后的蛋白沒(méi)有明顯沉淀，但是渾濁，在透析袋離看不出渾濁，一倒出來(lái)就混了，而且跑蛋白膠什么都沒(méi)有，測(cè)濃度，用水調(diào)零，什么都沒(méi)有，用pbs調(diào)零，濃度能0.1mg/ml。 各位蟲(chóng)友們，有想法建議的跟我說(shuō)說(shuō)唄，愁死了。。。。  |
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2樓2015-01-14 15:12:09
3樓2015-01-14 16:06:05
4樓2015-02-16 09:40:03
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