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qingfeng2011金蟲 (正式寫手)
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[求助]
酵母雙雜求助-質粒在酵母中的表達(Gal4系統(tǒng)) 已有4人參與
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親愛的各位蟲友,本人最近在做酵母雙雜驗證兩個蛋白的互作,是將2個質粒依次轉到AH109 中的,所用載體為pGBKT7 和pGADT7。在缺色氨酸和亮氨酸的SD培養(yǎng)基上能長出單菌落,并且PCR驗證兩個質粒都已轉入。但是四缺板加JA-Ile(只有加入這種物質才可發(fā)生互作)后并沒有菌落生長。 對于這種原因,自己也進行了以下分析,可能 蛋白并沒有表達。但是有一篇Nature就做出來了,只不過我們用的載體的差別在于他們用的是Gateway系統(tǒng),我們是普通的載體,載體名稱都是一樣的。非常困惑,請各位蟲友幫忙解答!萬分感謝! |
鐵桿木蟲 (正式寫手)

銀蟲 (小有名氣)
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