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qingfeng2011金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
酵母雙雜求助-質(zhì)粒在酵母中的表達(dá)（Gal4系統(tǒng)） 已有4人參與
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親愛(ài)的各位蟲(chóng)友，本人最近在做酵母雙雜驗(yàn)證兩個(gè)蛋白的互作，是將2個(gè)質(zhì)粒依次轉(zhuǎn)到AH109 中的，所用載體為pGBKT7 和pGADT7。在缺色氨酸和亮氨酸的SD培養(yǎng)基上能長(zhǎng)出單菌落，并且PCR驗(yàn)證兩個(gè)質(zhì)粒都已轉(zhuǎn)入。但是四缺板加JA-Ile（只有加入這種物質(zhì)才可發(fā)生互作）后并沒(méi)有菌落生長(zhǎng)。 對(duì)于這種原因，自己也進(jìn)行了以下分析，可能 蛋白并沒(méi)有表達(dá)。但是有一篇Nature就做出來(lái)了，只不過(guò)我們用的載體的差別在于他們用的是Gateway系統(tǒng)，我們是普通的載體，載體名稱都是一樣的。非常困惑，請(qǐng)各位蟲(chóng)友幫忙解答！萬(wàn)分感謝！ |
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君酷
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5樓2016-07-02 15:06:28
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