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1990xuxiao銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
關(guān)于酵母同源重組的問(wèn)題
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| 我想問(wèn)一下，在酵母同源重組時(shí)，選擇用>10ug量的含同源臂的PCR片段電轉(zhuǎn)和選擇用含同源臂目的片段的線性化質(zhì)粒電轉(zhuǎn)酵母，同源重組效率更高更好，為什么呢 |
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luwei13566
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+3, 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2014-07-23 12:54:29
gyesang: 回帖置頂 2014-07-23 12:54:41
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| 直接擴(kuò)增出來(lái)的片段只要含有大小合適的同源臂和篩選標(biāo)記作用和載體是一樣的。但是PCR產(chǎn)物必須得純化，除去引物二聚體和雜帶，而且還得測(cè)序保證序列的準(zhǔn)確度，純化后如果你還能得到>10ug的產(chǎn)物那自然沒(méi)有問(wèn)題。載體的好處是你不需要考慮同源臂大小和內(nèi)部的必要元件，直接把你的基因和載體連上再轉(zhuǎn)化就可以了 |
8樓2014-07-22 22:53:10
★
1990xuxiao(金幣+1): 謝謝參與
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祝福 [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
2樓2014-07-22 20:25:06
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1990xuxiao(金幣+1): 謝謝參與
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3樓2014-07-22 20:28:59
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4樓2014-07-22 20:31:24
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5樓2014-07-22 20:31:25
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6樓2014-07-22 20:32:42
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7樓2014-07-22 20:33:46
Neo2000
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10樓2014-07-26 10:02:12
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