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1990xuxiao銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于酵母同源重組的問題
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| 我想問一下,在酵母同源重組時,選擇用>10ug量的含同源臂的PCR片段電轉(zhuǎn)和選擇用含同源臂目的片段的線性化質(zhì)粒電轉(zhuǎn)酵母,同源重組效率更高更好,為什么呢 |
木蟲 (著名寫手)
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祝福 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
木蟲 (正式寫手)
| 直接擴(kuò)增出來的片段只要含有大小合適的同源臂和篩選標(biāo)記作用和載體是一樣的。但是PCR產(chǎn)物必須得純化,除去引物二聚體和雜帶,而且還得測序保證序列的準(zhǔn)確度,純化后如果你還能得到>10ug的產(chǎn)物那自然沒有問題。載體的好處是你不需要考慮同源臂大小和內(nèi)部的必要元件,直接把你的基因和載體連上再轉(zhuǎn)化就可以了 |

銀蟲 (正式寫手)
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