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液相流動相配置問題（相同配置方法，分離結(jié)果差異） 已有2人參與
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液相流動相A、B相均由乙腈-甲醇-緩沖溶液組成，只是比例不一。但是配置得到的不同批次流動相，在分離目標體系（比較復雜）時，峰的分離結(jié)果不一 90min的梯度洗脫程序，在50-55min區(qū)段內(nèi)兩峰理想時R=1.0，不理想時兩峰共洗脫成一個峰。 流動相配置時： 為了減少批次間的差異，用容量瓶進行緩沖鹽溶液的配置（緩沖體系是KH2PO4-H3PO4) 每次調(diào)節(jié)pH前均會校準pH計 量取乙腈、甲醇和緩沖鹽時用同一量筒以確保比例的準確 因為分離結(jié)果直接與不同批次有關(guān)，不存在同一批次的流動相分離結(jié)果有好有壞，所以應該不會是柱效的降低、流動相脫氣不充分等問題 想請問造成不同批次流動相下分離效果差異的原因還有哪些，出現(xiàn)這樣的問題是不是說明緩沖體系的緩沖容量不夠呢？應該怎么解決？ Ps： Buffer: 10.2 g of monobasic potassium phosphate in a 1000-mL volumetric flask. Dissolve in 950 mL of water. While stirring, adjust with phosphoric acid to the target pH, and dilute with water to volume. Solution A: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:5:75) Solution B: Acetonitrile, methanol, and Buffer (20:30:50) |
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