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supersky3195銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
半定量一個組織PCR做不出來,求助 已有4人參與
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我是做3個組織的半定量,濃度開始很高,在500ng左右,在500ng濃度時(是有些高),A和B組織的內(nèi)參和目的基因都能跑出來,C組織跑不出來,之后我就稀釋,并做了梯度,A和B 也都能跑出來,但是C卻跑不出來。我把初始濃度的模板跑了塊膠,都有亮帶,且C的最亮,將三個組織跑了內(nèi)參并且跑膠,也是能檢測出來,但為什么做半定量時C卻一直跑不出來。C組織我一共做了500ng,100ng,50ng,25ng的,都不理想,低濃度下只有零星的幾個能跑出來,但CT 較高,請問各位高手大俠,小弟真是有些沒辦法了,是否需要將原模板用試劑盒純化下? |

銀蟲 (小有名氣)

鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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