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四月雨滴銀蟲 (小有名氣)
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[交流]
苯酚氯仿抽提 已有2人參與
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| 有苯酚氯仿異戊醇抽提DNA，有機(jī)相是上層，是怎么回事？？？？ |
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zhuobaowen
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5樓2015-01-27 08:52:46
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-26 20:13:05
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-26 20:13:05
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酚能使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)抑制了DNase的降解作用。用苯酚處理勻漿液時(shí)，由于蛋白與DNA 聯(lián)結(jié)鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團(tuán)與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。 氯仿：克服酚的缺點(diǎn)；加速有機(jī)相與液相分層。 最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的跡量酚。（酚易溶于氯仿中） 異戊醇：減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產(chǎn)生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定。 |
2樓2015-01-26 09:21:53
四月雨滴
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3樓2015-01-26 15:10:33
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4樓2015-01-26 15:15:21
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