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skeeterhuang鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
pcr產(chǎn)物電泳后僅一個樣品出現(xiàn)條帶，求助 已有4人參與
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提DNA后，測定濃度在20-100ng/ml，配置出PCR體系，跑電泳，只有Maker和一個樣品有條帶，其他的都無條帶，樣品是處理不同時間的銅綠微囊藻團聚物，有條帶的是處理中間時間的，自己實在找不到原因，第一次做分子實驗，請大家多多指教。 20150309_213547_HDR.jpg |
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2樓2015-03-10 08:25:59
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3樓2015-03-10 10:27:37
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2015-03-10 22:44:26
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西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2015-03-10 22:44:26
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您好，看圖大概也能一知半解了，marker跑的也不是很好（這說明膠的質(zhì)量需要改進）。 除了一個條帶，其他盡然連雜帶都沒有，所以最先考慮的是模板，模板是否已經(jīng)降解了，模板提取了多長時間，保存條件是什么？引物暫時不考慮，等你出現(xiàn)條帶之后在考慮是否為目的條帶在考慮引物（個人建議，做實驗一步一步來，先找出來為什么沒有條帶然后再考慮條帶大小是否正確）。 然后，試劑問題，你所用的試劑是否已經(jīng)過期或者因為保存不當失效，當然我不知道你做實驗的情況，所以無論概率大小，我們都得說出來嘛，有的時候做不出來，恰恰就是最簡單的道理，試劑問題，尤其是酶，分為不同種類，熱啟動Taq酶，長片段高保真聚合酶，甚至超保真聚合酶等等，選擇也是非常重要的。 希望找到問題所在，祝好運 |
4樓2015-03-10 11:20:58
18945926953
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5樓2015-03-11 20:49:28
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