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yuman0709鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
轉(zhuǎn)化相關(guān)問題-無法轉(zhuǎn)化成功 已有8人參與
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| 最近做轉(zhuǎn)化，一直轉(zhuǎn)化不成功！酶切用的是BamHI 和EcoRI ，質(zhì)粒是PET-28a，宿主是大腸，做了好幾批轉(zhuǎn)化了，轉(zhuǎn)化的平板就是沒有菌。我將感受態(tài)涂布，平板上不長(zhǎng)菌，轉(zhuǎn)化空載，平板上會(huì)有很多菌，說明感受態(tài)沒問題吧。我進(jìn)行雙酶切驗(yàn)證，酶也沒問題，我對(duì)目的基因進(jìn)行雙酶切并純化后，進(jìn)行跑膠，有條帶，說明是有目的基因的。接下來只有連接酶了，接連兩次用的都是新酶，轉(zhuǎn)化的平板上就是沒有菌落，這是為什么？我的思路錯(cuò)哪了？實(shí)驗(yàn)一直沒有進(jìn)展，急！ |
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還以為是什么酶呢！傻掉了。。。 7樓2015-03-17 15:15:53
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