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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 轉化相關問題-無法轉化成功
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yuman0709鐵蟲 (初入文壇)
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轉化相關問題-無法轉化成功 已有8人參與
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| 最近做轉化，一直轉化不成功！酶切用的是BamHI 和EcoRI ，質粒是PET-28a，宿主是大腸，做了好幾批轉化了，轉化的平板就是沒有菌。我將感受態(tài)涂布，平板上不長菌，轉化空載，平板上會有很多菌，說明感受態(tài)沒問題吧。我進行雙酶切驗證，酶也沒問題，我對目的基因進行雙酶切并純化后，進行跑膠，有條帶，說明是有目的基因的。接下來只有連接酶了，接連兩次用的都是新酶，轉化的平板上就是沒有菌落，這是為什么？我的思路錯哪了？實驗一直沒有進展，急！ |
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還以為是什么酶呢！傻掉了。。。 7樓2015-03-17 15:15:53
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