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kekexiliwolf金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
小屁蟲(chóng)
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[求助]
gst 融合蛋白切掉GST tag后目的蛋白沉淀怎么辦？
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| 請(qǐng)教各位前輩，我最近在試圖表達(dá)一個(gè)蛋白，溶解性不好，所以借助gst tag一是想增加溶解性，二是便于純化，加上gst之后確實(shí)很成功，表達(dá)的很好，但是將GST切掉之后（TEV位點(diǎn)，用TEV酶切的）第二天早上發(fā)現(xiàn)大量沉淀，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)沉淀有未切完全的融合蛋白，有切割之后的目的蛋白，還有GST也有沉淀，本來(lái)覺(jué)得gst溶解性很好。不應(yīng)該沉淀，不知道為什么，本人是個(gè)菜鳥(niǎo)，請(qǐng)各位前輩多多指教，教教我能否有啥好辦法解決這個(gè)問(wèn)題。 |
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