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小馬fight新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)教各位關(guān)于動(dòng)物組織RNA提取的的問(wèn)題，一直提不出來(lái)，請(qǐng)各位給點(diǎn)建議。 已有9人參與
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| 就從頭開(kāi)始說(shuō)吧，研一的學(xué)生，年前開(kāi)始做這個(gè)方面，但一直跑不出條帶，用尿囊液可以提取出來(lái)，用的是羅氏病毒RNA提取試劑盒，用的剪刀、鑷子、研缽、研磨器高壓滅菌，送來(lái)的病料一般是冷凍的，解凍之后在冰上研磨，加的是PBS（上一次加了用DEPC處理的水，但也沒(méi)出條帶），研磨之后13000r離心15分鐘，取200微升上清用試劑盒提取總RNA，大體步驟是這樣，問(wèn)一下各位常做這個(gè)的這些步驟里面哪些會(huì)有RNA酶污染，老師給提供了固相RNA酶清除劑，但還沒(méi)有使用，請(qǐng)各位提供點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)吧，謝謝了。 |
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小馬fight
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9樓2015-12-27 20:25:12
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【答案】應(yīng)助回帖
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我也最近從植物組織里提RNA,每次提取前所有的槍頭，EP管，研缽，用到的所有物品都用DEPC水溫育過(guò)夜，然后高溫滅菌，材料也是新鮮的組織，但提取效果不好，每次5s基本沒(méi)帶，28s也降解的厲害，求大神支招 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
10樓2015-12-27 22:33:25
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