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AZUREIRIS
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[求助]
大腸桿菌red重組,電轉(zhuǎn)總是失敗,求助大神。。。 已有1人參與
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| 我最近在做大腸桿菌的red重組,前期已經(jīng)將原菌株卡那片段敲除,現(xiàn)在準(zhǔn)備插入PKD4來敲除另外一個基因。但是用電轉(zhuǎn)法一直不成功,細胞電轉(zhuǎn)前水洗了4次,可是師兄說電轉(zhuǎn)失敗還是沒有洗干凈,求教怎么能徹底洗干凈,或者,其他環(huán)節(jié)有什么地方可以改進的,比如菌體濃度大概長到OD多少,我每次沒有測OD ,直接目測,長了6小時,比較濃,有點像牛奶。還有一個對照長了4小時,比較淡。。新手金幣比較少,還望大神幫我。。。多謝。。。。 |
新蟲 (小有名氣)
銀蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
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