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l找牛奶金蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助： 使用western blot 法測定特定組織中酶蛋白的表達 已有1人參與
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如題， 本蟲為非藥理學專業(yè)， 現(xiàn)想要測定一個提取物連續(xù)給藥對大鼠組織中酶蛋白表達的影響。 因為從前沒有做過，本實驗室內(nèi)也沒有經(jīng)驗，特此發(fā)帖求助。 大概學習了一下，應該需要在電泳蛋白質(zhì)分離后使用一抗、二抗標記，染色后分析條帶灰度。 但是不明白幾個事情： 1.需要準備哪一種試劑盒，怎樣選擇試劑盒？ 2.在哪幾步中會用到試劑盒？ 3.組織在取樣后應該怎樣冷凍？必須用液氮冷凍嗎？ 總之，將實驗看下來一遍，還有很多不清楚，至少先弄明白試劑盒的選購和組織樣品的收集吧！ 麻煩大家了，謝謝^^！ |
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回復第三問：組織取樣應該在冰上操作，剪取適合大小的組織后用錫箔紙包起來，然后迅速丟入液氮或-80度的冰箱中。如果沒有液氮，也可以暫時取好組織后放在冰箱-20度保存一會，最后一起放入-80的冰箱。 順便把我們實驗室的Western Blot的操作流程發(fā)給你。 |
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2016-01-24 10:00:03, 23.91 K
4樓2016-01-24 10:00:09
l找牛奶
金蟲 (初入文壇)
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