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rescuz金蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于原核生物RNA提取，最后總是有基因組殘余問題，求幫助 已有1人參與
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如題所示，Lz最近在進(jìn)行分子實驗，需要提取目的菌株的RNA作為陰性對照，用反轉(zhuǎn)錄得到的CDNA進(jìn)行PCR,所以對RNA的純潔度有很高要求，但是每每提取RNA接著直接以RNA為模版，用基因組的任意引物PCR都能得到較亮的目的條帶,,所以肯定是有基因組污染的，LZ很困惑啊，希望大家多多賜教!!! ps用水做了陰性對照，木有p出條帶，在超凈臺里準(zhǔn)備的實驗。 pcr程序 primer star MAX 98度10s;55度10s;72度30s,35-40個循環(huán)，目的片段大小有500bp長短的也有1000bp左右的，所以時間設(shè)為30s. |
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rescuz4樓2015-04-15 15:57:56
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5樓2015-04-16 11:20:47
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