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天宇201266

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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[求助] 如何構(gòu)建PCR反應(yīng)體系、PCR反應(yīng)條件已有5人參與

本人剛接觸PCR，不知道PCR反應(yīng)體系以及PCR反應(yīng)條件如何設(shè)定，以及所依據(jù)的原理，求指導(dǎo)，謝謝，比如50ul的反應(yīng)體系，模板、引物、緩沖液、鎂離子、水的量是依據(jù)什么來(lái)選定的，求高手指導(dǎo)，謝謝

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在路上。。。

1樓 2015-04-24 19:41:13

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yingheqian

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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【答案】應(yīng)助回帖

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這個(gè)也來(lái)這問(wèn)？有這個(gè)時(shí)間隨便找篇文獻(xiàn)，里面都有了

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5樓2015-04-25 12:14:34

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草溪河

鐵蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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這個(gè)嘛，其實(shí)在網(wǎng)上一搜一大把，還可買(mǎi)PCR MIX，照說(shuō)明書(shū)就行

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2樓2015-04-24 23:39:47

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酒家何處

新蟲(chóng) (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-04-25 23:28:17
天宇201266: 金幣+1, ★有幫助 2015-04-27 13:34:58

一般需要模板引物就行了。現(xiàn)在dntp，taq，mg2+都是預(yù)混型的。市場(chǎng)簡(jiǎn)稱(chēng)mix。50ul，正常1ul模板，引物各1ul，水22，mix25

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3樓2015-04-25 10:57:01

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neckey

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

你做PCR的目的是什么？如果有相關(guān)的試劑盒的話可以參考該試劑盒的說(shuō)明書(shū)，一般說(shuō)明書(shū)里有建議的反應(yīng)體系，也可以問(wèn)問(wèn)實(shí)驗(yàn)室的其他小伙伴，也許他們知道。希望能幫到你，我也只是一個(gè)學(xué)徒

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4樓2015-04-25 11:30:01

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普通表情龍兔虎貓

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