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微生物發(fā)酵液粗提物HPLC分析波長選擇 已有1人參與
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| 我要檢測的物質(zhì)是微生物發(fā)酵液萃取出來的物質(zhì)，具體是什么物質(zhì)現(xiàn)在也不知道，沒有標準品，可以溶于甲醇，我進行了全波長掃描，最大吸收峰是249nm,但是還有很多不同波長下的峰值，所以不太確定怎么選擇波長的事情，希望有人能指點一下。謝謝 |
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zhenwuhuang
至尊木蟲 (文學泰斗)
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【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
chin_jl: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝 2015-05-09 16:45:34
感謝參與，應助指數(shù) +1
chin_jl: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝 2015-05-09 16:45:34
| 先說色譜條件吧 乙酸根的檢測波長是210nm ， 色譜條件1 Agilent SB-Aq C18 （250*4.6mm， 5um）， 25mM 磷酸二氫鉀緩沖液（pH 2.5），流速：1.0mL/min， 柱溫30度； 色譜條件2 C18 （250*4.6mm， 5um）， 25mM 磷酸二氫鉀緩沖液（pH 2.5）：ACN=98:2，兩者按比例混合均勻，單泵運行，流速：1.0mL/min， 柱溫30度； 色譜條件3 Sepax Carbomix H-NP 10:8%， 4.6*300，流速0.6mL/min，柱溫：55度，流動相：2.5mM硫酸。這三種方法反正都用來測過乙酸的。但是樓主的樣品比較復雜，所以不好說，有離子交換柱最好，不行的話，C18也將就用吧，另外如果能用離子色譜來做應該也可以，這個時候估計要用離子排斥柱了。祝好哈~ |
2樓2015-05-09 16:38:33
3樓2015-05-09 16:45:22
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