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一個難溶解，難表達(dá)蛋白的分析(RBMX)
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| RBMX（ RNA binding motif protein, X-linked ） Gene ID: 27316一共兩個轉(zhuǎn)錄本，我研究的是 第一個轉(zhuǎn)錄本，一共391個氨基酸。我首先敘述一下這個 蛋白的結(jié)構(gòu)和功能，這個是RNA結(jié)合蛋白，是hnRNA在加工成熟mRNA工程中的蛋白復(fù)合物之一，最近研究表明RBMX參與DNA雙鏈斷裂修復(fù)過程。用常用的裂解BUFFER裂解293，發(fā)現(xiàn)在上清中的RBMX很少，大多數(shù)出現(xiàn)在沉淀中（WB)，在293中過表達(dá)N端帶FLAG標(biāo)簽Flag-RBMX發(fā)現(xiàn)表達(dá)量很低(WB)，在E.coli中無法表達(dá)全長的RBMX蛋白，依據(jù)文獻(xiàn)進(jìn)行分段，發(fā)現(xiàn)第一段1-131氨基酸無法表達(dá)，而后面的兩端可以表達(dá)。我現(xiàn)在最需要能夠在細(xì)胞中拿到可溶性的RBMX，該怎么辦？ |
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 生化分析 |
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2樓2015-05-12 10:21:11
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