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[求助]
關(guān)于5-race的問題
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我使用的是clontech的5-race試劑盒，設(shè)計了3對引物，模板我加了90ul的TE緩沖液進行稀釋，實驗過程中我使用的是普通的Ex tap酶，upm加的5ul，自己的特異性引物加了1ul，模板加了1ul。 擴增過程中我篩溫度進行的，58℃到68℃擴第一輪，之后進行巢式pcr，也是篩的溫度，加1ul的short和1ul的特異性引物。 擴增結(jié)果是出現(xiàn)一條1000bp的帶，測序回來證明是單引物循環(huán)。并且除了這條帶其他的帶都是有時擴增有有時擴增沒有。 我該怎么辦�。∏蟠髠b給答案啊！ |
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2樓2015-05-17 10:40:58
3樓2015-06-04 10:00:27
火紅的夕陽
新蟲 (小有名氣)
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4樓2017-09-09 21:43:52
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