 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1439 | 回復(fù): 2 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
Mike6514新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
RNAiso plus法提取構(gòu)巢曲霉RNA 已有1人參與
|
|
|
各位大神求幫幫忙吧，提了快一個(gè)月的RNA了，用的是RNAiso plus法，提構(gòu)巢曲霉的RNA,一直沒有提出來過，我先說說我的試劑吧： （1）RNAiso PLUS （2）氯仿 （3）異丙醇 （4）75%乙醇（DEPC處理水配制） （5） RNase-free水（用DEPC水替代） （6）5mol/L的Nacl溶液和高鹽溶液（0.8mol/L的檸檬酸鈉和1.2mol/L的Nacl） 實(shí)驗(yàn)所用1.5ml離心管，槍頭用都用0.1% DEPC水浸泡后于120℃下高壓滅菌20分鐘以除去殘留的DEPC。實(shí)驗(yàn)操作過程中帶一次性手套，在超凈工作臺(tái)進(jìn)行，操作過程全程避免說話。 實(shí)驗(yàn)操作： 1、將構(gòu)巢曲霉接種到鋪有玻璃紙的PDA培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)3d。 2.、用無菌的鑷子刮取菌絲，稱取0.2g菌絲體于研缽中，用經(jīng)過液氮預(yù)冷的杵子充分研磨，直至菌絲成粉末狀，立即進(jìn)行RNA抽提。 3、將粉末迅速轉(zhuǎn)移至加有1 ml TRIZOL 的2.0 ml離心管中，震蕩混勻，室溫下靜置5分鐘。 4、加入0.25 ml氯仿和0.25ml的5mol/L的Nacl溶液，劇烈震蕩混勻后，室溫下靜置5分鐘。 5、4℃、12000 r/min離心10min 6、取上清，至另一2.0 ml離心管中，加入等體積的異丙醇和等體積的高鹽溶液，（以后操作在冰上進(jìn)行）顛倒離心管數(shù)次混勻，-20℃放置15 min沉淀RNA。 7、4℃、12000 r/min離心10min 8、棄上清，加入75％乙醇1 ml洗滌沉淀（1-2次）。 9、4℃、12000 r/min離心5min 10、棄上清，將離心管置于超凈臺(tái)上自然揮干5 -8min。 11、 加入無RNase的雙蒸水20ul，55~60℃放置10min，溶解RNA，一70℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br /> 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖（RNA的0.8%的瓊脂糖凝膠跑膠25min）: 做了五六次，提出的RNA都是這個(gè)結(jié)果，很是郁悶，求大神指點(diǎn) RNA的0.8%的瓊脂糖凝膠跑膠25min.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有137人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 個(gè)人的細(xì)菌總RNA提取總結(jié)（TRIZOL法）
已經(jīng)有183人回復(fù)
- Trizol 法怎么提取高質(zhì)量RNA
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 堿裂解法提取質(zhì)粒時(shí)怎么減少RNA？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- Trizol 法 RNA提取失敗 請(qǐng)蟲友幫忙分析下 什么原因?該怎么辦吖
已經(jīng)有18人回復(fù)
- CTAB法提取RNA,電泳后完全無條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- TRIZOL法提取NP69細(xì)胞的RNA
已經(jīng)有3人回復(fù)
- invitrogen 的RNA提取中文版 trizol 法
已經(jīng)有235人回復(fù)
- RNA提取TRIZOL法最關(guān)鍵的注意步驟是什么
已經(jīng)有18人回復(fù)
- CTAB法提取RNA
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】Tkara的RNAiso Plus，提取RNA你能否在提取蛋白質(zhì)呢？
已經(jīng)有10人回復(fù)
J1663141418
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 120.7
- 帖子: 27
- 在線: 13.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 5280245
- 注冊(cè): 2016-11-25
- 專業(yè): 微生物學(xué)
3樓2018-05-25 21:20:33
往陽光多處走
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 6.4
- 帖子: 81
- 在線: 44.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 4911189
- 注冊(cè): 2016-08-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
2樓2018-04-23 14:49:13
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請(qǐng)] 請(qǐng)教下大家 2026年國(guó)家基金申請(qǐng)是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +4 | 收到VS 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +7 | 你好明天你好 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +4 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +7 | 用戶573181 2026-03-20 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +3 | Promise-jyl 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +5 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +5 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +4 | plum李子 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 廣西大學(xué)材料導(dǎo)師推薦 +3 | 夏夏夏小正 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 要好好無聊 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +3 | 李軼男003 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 南京大學(xué)化學(xué)376求調(diào)劑 +3 | hisfailed 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +15 | 陌の森林 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 320求調(diào)劑0856
+3
|
不想起名字112 2026-03-19 | 3/150 |
|