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lilyll新蟲 (初入文壇)
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[求助]
怎么防止RNA降解？ 已有3人參與
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用trizol提取細(xì)胞的RNA,RNA降解的太厲害，各位大神有什么方法來降低它的降解啊？ [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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2樓2015-06-02 01:02:31
lilyll
新蟲 (初入文壇)
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3樓2015-06-02 08:13:50
4樓2015-06-02 09:34:01
calorimetry
銅蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 從提取RNA一開始就選擇性的使用RNase的蛋白質(zhì)變性試劑（如酚、氯仿等有機(jī)溶劑以及強(qiáng)烈的胍類變性劑）、蛋白水解酶（如蛋白酶K）和能夠與蛋白質(zhì)結(jié)合陰離子去污劑（比如SDS、脫氧膽酸等），并且聯(lián)合使用RNase的特異性抑制劑（比如RNasin、DEPC等），能最大限度地防止能源性RNase對(duì)于RNA的降解。另外，在變性液中加入Beta 巰基乙醇，DTT等還原劑也可以破壞RNase的二硫鍵，有利于RNase的變性、水解和滅活。 |
5樓2015-06-02 12:18:14
6樓2015-06-02 16:35:38
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