 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3544 | 回復(fù): 21 | |||
zhangyep121銅蟲 (小有名氣)
|
[交流]
關(guān)于熱啟動taq酶和逆轉(zhuǎn)錄酶相互抑制的問題
|
| 親們，發(fā)揮大家想象力和智商的時候到了，我現(xiàn)在遇到一個PCR難題，跟大家討論一下，希望大家集思廣益，支支招，在做RNA類擴(kuò)增的時候，發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄酶對熱啟動taq酶存在抑制作用，這一點(diǎn)已經(jīng)確認(rèn)了，目前發(fā)現(xiàn)，只有在taq酶和逆轉(zhuǎn)錄酶都有活性的情況下，才會抑制，taq酶只有在跟Mg2+接觸時，才有活性，也就是說，不遇到鎂離子，taq酶是不會受逆轉(zhuǎn)錄酶影響的，而50度逆轉(zhuǎn)錄期間，taq酶一旦具有活性，就會被體系中的逆轉(zhuǎn)錄酶搞，影響擴(kuò)增效果，但是50度時如果沒接觸到逆轉(zhuǎn)酶，即使在95度時加入逆轉(zhuǎn)錄酶，是不會影響擴(kuò)增效果的，也就是說逆轉(zhuǎn)錄酶失活后，不抑制taq酶，現(xiàn)在請問大家：如何使50度15分鐘逆轉(zhuǎn)錄階段，Mg離子，taq酶，逆轉(zhuǎn)錄酶，在一個體系中，卻又不相互影響？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有110人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- Taq 酶擴(kuò)增的片段能連接平末端載體嗎
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 高保真PCR酶的選擇問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 求賜教，擴(kuò)增3000bp片段是用高保真Taq酶好，還是用高保真再加A尾好一點(diǎn)？
已經(jīng)有27人回復(fù)
- Taq和KOD酶使用討論
已經(jīng)有7人回復(fù)
- Taq聚合酶的活性
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 有沒有人用過全式金公司的熱啟動Taq酶，那個算高保真酶么
已經(jīng)有7人回復(fù)
- KOD和Taq酶的PCR產(chǎn)物為什么不一樣？請各位高手指點(diǎn)一下！
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助！群落PCR，忘記加taq酶，可以在原來的體系中補(bǔ)上taq酶重新PCR么？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物末端加A，Taq酶的選擇
已經(jīng)有3人回復(fù)
- LA taq ,ex taq, rtaq, dream taq 有什么不同？PCR情況很詭異
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 相同條件下，taq酶可以PCR出條帶，而Primer star卻不能
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 關(guān)于taq酶后加A的交流
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 大家做PCR 的時候都用的什么taq酶
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 做PCR加taq酶時忘記換槍頭了，酶還能用嗎？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- Taq酶PCR的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于TAKARA的Ex Taq 酶~
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 圖例請教聚合酶（Taq酶)外切和內(nèi)切具體怎么起作用的，急！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- Ex taq酶的保真性？？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- puf酶與普通Taq酶混用PCR問題
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助】takara的LA—Taq酶能不能直接用于T載體的連接...？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助】高保真的taq酶 怎么才能產(chǎn)生polyA尾巴
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】普通Taq酶突變率的問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【分享】大家用TAKARA試劑（普通的TAQ酶），出問題的可多？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】將PCR反應(yīng)體系中的buffer,mg2+,dNTP,Taq酶以及引物和水混合后-20℃長期?/a>
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【分享】提高PCR特異性的方法
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【專題】PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)指南
已經(jīng)有535人回復(fù)
18761615793
木蟲 (正式寫手)
小蟲
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 172 (高中生)
- 金幣: 646.4
- 散金: 170
- 紅花: 16
- 帖子: 863
- 在線: 144.9小時
- 蟲號: 3603131
- 注冊: 2014-12-19
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
2樓2015-06-04 09:20:32
cry_2013
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 47 (小學(xué)生)
- 金幣: 1960.8
- 散金: 342
- 紅花: 6
- 帖子: 366
- 在線: 246.6小時
- 蟲號: 3426497
- 注冊: 2014-09-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
3樓2015-06-04 09:32:53
18761615793
木蟲 (正式寫手)
小蟲
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 172 (高中生)
- 金幣: 646.4
- 散金: 170
- 紅花: 16
- 帖子: 863
- 在線: 144.9小時
- 蟲號: 3603131
- 注冊: 2014-12-19
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
4樓2015-06-04 14:43:52
zhangyep121
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 411.6
- 散金: 80
- 紅花: 5
- 帖子: 205
- 在線: 65.3小時
- 蟲號: 1135820
- 注冊: 2010-10-31
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
5樓2015-06-05 13:50:31
zhangyep121
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 411.6
- 散金: 80
- 紅花: 5
- 帖子: 205
- 在線: 65.3小時
- 蟲號: 1135820
- 注冊: 2010-10-31
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
6樓2015-06-05 13:51:35
zhangyep121
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 411.6
- 散金: 80
- 紅花: 5
- 帖子: 205
- 在線: 65.3小時
- 蟲號: 1135820
- 注冊: 2010-10-31
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
7樓2015-06-05 13:52:02
8樓2015-06-05 14:56:06
zhangyep121
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 411.6
- 散金: 80
- 紅花: 5
- 帖子: 205
- 在線: 65.3小時
- 蟲號: 1135820
- 注冊: 2010-10-31
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
9樓2015-06-05 15:01:35
18761615793
木蟲 (正式寫手)
小蟲
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 172 (高中生)
- 金幣: 646.4
- 散金: 170
- 紅花: 16
- 帖子: 863
- 在線: 144.9小時
- 蟲號: 3603131
- 注冊: 2014-12-19
- 專業(yè): 抗體工程學(xué)
10樓2015-06-05 15:05:40
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zhangyep121 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿211 初試270分 求調(diào)劑 +3 | 谷雨上岸 2026-03-23 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研]
 0854 考研調(diào)劑 招生了！AI 方向
+3
|
pk3725069 2026-03-19 | 14/700 |
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +9 | chuanzhu川燭 2026-03-18 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 070300，一志愿北航320求調(diào)劑 +3 | Jerry0216 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 323求調(diào)劑 +6 | 洼小桶 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 冬十三 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +5 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 260求調(diào)劑 +3 | 朱芷琳 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Zhangbod 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 要好好無聊 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +3 | Jack?k?y 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +5 | 申子申申 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | eation27 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 320求調(diào)劑0856
+3
|
不想起名字112 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|