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[求助]
免疫染色中的固定問題
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| 剛剛接觸免疫染色，總是染不上顏色，大家給看看是什么原因：1 染色的組織（很�。┰诨铙w內(nèi)非常軟，即使剖出來形態(tài)也不好易扭曲，所以，我都是先用多聚甲醛固定1h-3h，固定完后，組織變硬，形態(tài)也特別好看。所以我想問的是，固定后的組織是否交聯(lián)程度較強(qiáng)，從而把 抗原封閉而導(dǎo)致不能染上色的？看到有人說要抗原修復(fù)，如果用高溫修復(fù)，那么蛋白質(zhì)不是變性了嗎？變性后的抗原還能跟抗體結(jié)合嗎？2 在加入1抗和2抗反應(yīng)時(shí)，應(yīng)該在低溫還是高溫反應(yīng)呢？抗體一般保存在低溫中，如果高溫會(huì)不會(huì)也變性呢，從而不能結(jié)合乃至染色？請(qǐng)各位蟲友指教。 |
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