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krystal1110新蟲(chóng) (小有名氣)
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50mM pH7.5的PBS配制 已有1人參與
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| 50mM pH7.5的PBS怎么配制？ |
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sghio
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krystal1110: 金幣+5, ★有幫助 2015-07-02 20:14:03
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先配: 1M Na2HPO4：稱取358g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水 1M NaH2PO4：稱取156g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水 （一般不需要1000ml，將質(zhì)量和體積按比例縮小即可） 然后： 34.2ml的1M Na2HPO4與15.8ml的1M NaH2PO4混合，蒸餾水稀釋至1000ml,即得0.05M的磷酸鈉緩沖液(PH7.2)。 磷酸鹽緩沖液是由單價(jià)磷酸二氫鹽和雙價(jià)磷酸一氫鹽的混合物組成的。通過(guò)變化每種鹽的量，就可配制出pH 5.8至pH8.0之間緩沖液。磷酸鹽有很高的緩沖能力，在水中高度可溶。但是，它們也有不少潛在的缺點(diǎn)：(參考) 1.磷酸鹽緩沖液抑制許多酶促反應(yīng)和步驟，而這些酶促反應(yīng)和步驟恰恰是分子克隆的基礎(chǔ)，其中包括許多限制酶對(duì)DNA的切割，DNA的連接和細(xì)菌轉(zhuǎn)化等。 2因?yàn)榱姿猁}在乙醇中沉淀，不能用于沉淀DNA和RNA。 3磷酸鹽螯合像Ca2+和Mg2+這樣的陽(yáng)離子。 配置量、濃度和PH值不同，但計(jì)算方法都一樣：質(zhì)量/（分子量*體積） 補(bǔ)充一下: PB與PBS是不同的. PB是phosphate buffer, 而PBS是phosphate buffered saline, 從名字上就可知了吧? 后者是緩沖生理鹽水. 即, 在PB中加入0.8-0.9%的NaCl (有時(shí)我們按摩爾濃度取0.15mol/L), 其中的PB配制見(jiàn)上 |
2樓2015-06-19 15:22:51
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