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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 藥學 » 藥劑學 » 50mM pH7.5的PBS配制
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krystal1110新蟲 (小有名氣)
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50mM pH7.5的PBS配制 已有1人參與
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| 50mM pH7.5的PBS怎么配制？ |
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sghio
木蟲 (正式寫手)
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krystal1110: 金幣+5, ★有幫助 2015-07-02 20:14:03
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先配: 1M Na2HPO4：稱取358g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水 1M NaH2PO4：稱取156g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水 （一般不需要1000ml，將質量和體積按比例縮小即可） 然后： 34.2ml的1M Na2HPO4與15.8ml的1M NaH2PO4混合，蒸餾水稀釋至1000ml,即得0.05M的磷酸鈉緩沖液(PH7.2)。 磷酸鹽緩沖液是由單價磷酸二氫鹽和雙價磷酸一氫鹽的混合物組成的。通過變化每種鹽的量，就可配制出pH 5.8至pH8.0之間緩沖液。磷酸鹽有很高的緩沖能力，在水中高度可溶。但是，它們也有不少潛在的缺點：(參考) 1.磷酸鹽緩沖液抑制許多酶促反應和步驟，而這些酶促反應和步驟恰恰是分子克隆的基礎，其中包括許多限制酶對DNA的切割，DNA的連接和細菌轉化等。 2因為磷酸鹽在乙醇中沉淀，不能用于沉淀DNA和RNA。 3磷酸鹽螯合像Ca2+和Mg2+這樣的陽離子。 配置量、濃度和PH值不同，但計算方法都一樣：質量/（分子量*體積） 補充一下: PB與PBS是不同的. PB是phosphate buffer, 而PBS是phosphate buffered saline, 從名字上就可知了吧? 后者是緩沖生理鹽水. 即, 在PB中加入0.8-0.9%的NaCl (有時我們按摩爾濃度取0.15mol/L), 其中的PB配制見上 |
2樓2015-06-19 15:22:51
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