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aaa6239

木蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 微生物功能基因敲除技術(shù) 已有3人參與

本人研究一個(gè)細(xì)菌的功能基因。
想通過(guò)基因敲除后再看菌株的有關(guān)功能，繼而推斷該基因的重要性。
打聽(tīng)到許多生物公司可以做，但考慮到經(jīng)費(fèi)，只能自己做。
有現(xiàn)成的試劑（盒）購(gòu)買嗎？大概多少錢？
請(qǐng)做過(guò)的蟲(chóng)友支招，

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【求助/交流】枯草芽孢桿菌基因敲除~~ 已經(jīng)有9人回復(fù)

1樓 2015-07-06 18:02:02

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biosci

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引用回帖:

5樓: Originally posted by aaa6239 at 2015-07-07 21:05:37
我看文獻(xiàn)里有個(gè)別是自己設(shè)計(jì)質(zhì)粒的，對(duì)沒(méi)做過(guò)的人來(lái)說(shuō)有難哦！請(qǐng)問(wèn)你自己做過(guò)嗎？
...

敲除不難啊，首先找一種抗性，就是構(gòu)建敲除盒子，然后電轉(zhuǎn)化，篩陽(yáng)性克隆就是

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6樓2015-07-07 21:38:08

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biosci

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【答案】應(yīng)助回帖

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自己克隆個(gè)啟動(dòng)子，裝上抗性基因和同源臂，然后電轉(zhuǎn)化，篩選即可

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2樓2015-07-07 11:07:22

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lifechuteng

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

現(xiàn)在成熟的有自殺質(zhì)粒系統(tǒng)、RED重組系統(tǒng)、TALEN、CRISPR/Cas9系統(tǒng)等等，價(jià)格不會(huì)便宜的，個(gè)人感覺(jué)如果之前沒(méi)有基因敲除經(jīng)驗(yàn)，還不如交給公司去做……

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3樓2015-07-07 16:51:16

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aaa6239

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引用回帖:

3樓: Originally posted by lifechuteng at 2015-07-07 16:51:16
現(xiàn)在成熟的有自殺質(zhì)粒系統(tǒng)、RED重組系統(tǒng)、TALEN、CRISPR/Cas9系統(tǒng)等等，價(jià)格不會(huì)便宜的，個(gè)人感覺(jué)如果之前沒(méi)有基因敲除經(jīng)驗(yàn)，還不如交給公司去做……

現(xiàn)在是寫項(xiàng)目，必須要設(shè)計(jì)得能做出來(lái)。如果用red系統(tǒng)能買到全套質(zhì)粒嗎？

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

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4樓2015-07-07 21:03:36

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