 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1126 | 回復(fù): 4 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
再鬧不給糖新蟲 (正式寫手)
|
[求助]
RT-PCR引物設(shè)計(jì)求助 已有2人參與
|
|
|
我設(shè)計(jì)過兩次RT-PCR引物，第一次用的是primer premier 5.0 設(shè)計(jì)的引物，用的軟件自帶的搜索引物功能，然后參照Tm，GC含量（選取45%-60%之間Tm值相近的作為引物）以及還有dimer hairpin，false priming，選取自認(rèn)為最優(yōu)組合，然后發(fā)給公司合成回來之后，先用easy taq 酶體系跑普通pcr，凝膠檢測(cè)結(jié)果條帶比較暗，然后又用RT-PCR檢測(cè)了一次，無數(shù)據(jù)出現(xiàn)，電泳檢測(cè)，也沒有目的條帶出現(xiàn) 第二次設(shè)計(jì)RT-PCR是用NCBI網(wǎng)站來設(shè)計(jì)的，直接在上面輸入CDS序列，搜索引物，然后按照上面搜過結(jié)果，選取成對(duì)的引物，Tm值在60+-3 大都很相近 ,然后引物自身的dimer（NTI檢測(cè)，約2~5個(gè)），偶爾有發(fā)夾結(jié)構(gòu)存在， 直接送公司合成回來后，直接用的RT-PCR檢測(cè)，也無條帶出現(xiàn) 已確定cDNA無問題，RT-PCR試劑盒為 快精（英文名字好像是QIjin還是什么的，公司當(dāng)初取名快精還被笑稱過豬飼料） 引物長(zhǎng)度為20~22左右，經(jīng)過NCBI與目的材料全基因組比對(duì)之后，除了目的染色體上面引物全部匹配外，還有其他染色體約7~8個(gè)，是14~16個(gè)堿基連續(xù)匹配的，我有一個(gè)疑問，就是按照這個(gè)匹配度來說，RT-PCR是不是至少會(huì)有帶出現(xiàn)，不會(huì)出現(xiàn)無數(shù)據(jù)的情況吧、？ 還有一個(gè)就是RT-PCR引物設(shè)計(jì)問題，小白一個(gè)，初次接觸這個(gè)，真心不懂，設(shè)計(jì)了兩次之后，都沒效果，不知道該咋辦了，真心求助�。�！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有211人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- RT-PCR引物求助
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 細(xì)菌RT-PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有2人回復(fù)
- RT-PCR引物設(shè)計(jì)小白求問
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 跪求大神指導(dǎo)RT-PCR和Q-PCR引物問題
已經(jīng)有1人回復(fù)
- rt-pcr引物設(shè)計(jì)問題（新手求助，5555）
已經(jīng)有7人回復(fù)
- RT-PCR引物設(shè)計(jì)問題
已經(jīng)有2人回復(fù)
- RT-PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有0人回復(fù)
- RT-PCR的引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 基因組PCR用于驗(yàn)證RT-PCR引物的實(shí)驗(yàn)思路，請(qǐng)大蝦們把把關(guān)
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 誰做水稻BR信號(hào)，那些marker基因RT-PCR引物序列有么？？？急急急！��！
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 大神們，幫忙設(shè)計(jì)個(gè)引物吧！RT-PCR引物設(shè)計(jì)（大鼠MUC5ac)
已經(jīng)有11人回復(fù)
- RT-PCR隨機(jī)引物需要自己設(shè)計(jì)還是購(gòu)買的？
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 四步法消除SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)定量RT-PCR中引物二聚體的影響
已經(jīng)有46人回復(fù)
- RT-PCR 引物序列一樣算抄襲嗎
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 水稻RT -PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 大鼠肝臟酰基輔酶A膽固醇�；D(zhuǎn)移酶2（ACAT2）表達(dá) RT-PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 求高手指點(diǎn)：RT-PCR的引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有18人回復(fù)
- RT-PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】求教基因預(yù)測(cè)及RT-PCR引物設(shè)計(jì)問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR引物問題
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于RT-PCR引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】Real time RT-PCR 引物設(shè)計(jì)問題（高懸賞請(qǐng)高手幫忙）
已經(jīng)有28人回復(fù)
再鬧不給糖
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 3943.8
- 散金: 540
- 紅花: 2
- 帖子: 945
- 在線: 158.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 3568610
- 注冊(cè): 2014-11-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
5樓2015-07-28 17:18:36
2樓2015-07-21 22:45:10
再鬧不給糖
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 3943.8
- 散金: 540
- 紅花: 2
- 帖子: 945
- 在線: 158.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 3568610
- 注冊(cè): 2014-11-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
3樓2015-07-22 14:25:57
Kellyyoung
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3
- 帖子: 3
- 在線: 4.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 3185073
- 注冊(cè): 2014-05-06
4樓2015-07-28 15:20:55
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 考研材料工程351分調(diào)劑 +4 | 整個(gè)好的 2026-03-31 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +12 | 小黃鴨寶 2026-03-30 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085601英二數(shù)二求調(diào)劑 總分325 +4 | 余航航 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 不挑專業(yè) 求收留 +4 | Yam. 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本科211生物醫(yī)學(xué)工程085409求調(diào)劑339分 +7 | 里子木yy 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +10 | 舊吢 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿大連理工大學(xué)，機(jī)械工程學(xué)碩，341 +3 | 西瓜田的守望者 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料相關(guān)專業(yè)調(diào)劑 +10 | 哇呼哼呼哼 2026-03-30 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +9 | @taotao 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +8 | 十閑wx 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 抱歉 +3 | 田洪有 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +10 | 宋明欣 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +6 | @taotao 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +6 | 小懶蟲不懶了 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 | 海納百川Ly 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華理，數(shù)一英一285求A區(qū)調(diào)劑 +8 | AZMK 2026-03-25 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動(dòng)285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +5 | 求求讓我有書讀?/a> 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|