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weizhi111至尊木蟲 (正式寫手)
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怎樣提高融合蛋白表達(dá)量 已有6人參與
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| 在BL21菌株中誘導(dǎo)表達(dá)蛋白,用的是GST標(biāo)簽,做了幾次發(fā)現(xiàn)上清里面誘導(dǎo)的蛋白很少,掛柱洗脫后幾乎看不見條帶。沉淀(包涵體)蛋白還比較多。誘導(dǎo)條件試過IPTG 0.5mM 16度過夜,但I(xiàn)PTG 改成0.3mM 16度過夜后總體誘導(dǎo)表達(dá)量就減少了,上清沉淀都少,該怎么解決呢?最后蛋白是要用來測(cè)酶活的,所以誘導(dǎo)純化過程不能破壞酶活。請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)者幫助! |
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