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mingfengpbpb木蟲 (正式寫手)
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磷酸鹽緩沖液流動相 已有2人參與
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1、我在做一個抗生素的含量測定,流動相是磷酸鹽緩沖液:乙腈88:12,C18柱子,一直不太明白,流動相里加鹽的作用是什么?是為了保持PH值不變嗎? 2、做了兩個月左右了,柱子就分不開峰了,工程師過來把填料重新裝了一下,然后我用流動相走了幾針標品(用水配制的),峰型非常不好,峰面積還很低。然后換用水:乙腈95:5沖柱子,結(jié)果在2min左右出了一個大峰,隨后我又進了一針標品,還是用的水:乙腈95:5,結(jié)果在9min出峰,這樣是說明流動相中乙腈比例太高了嗎?或者是其他的什么原因呢?請各位大神指點,不勝感激。 3、流動相帶鹽太傷柱子了,能不能不加鹽呢? 4、藥典里流動相是磷酸鹽:乙腈98:2,當時用這根柱子時,我是從98:2一點點加大有機相比例的,為的是把保留時間提前到合適的位置。 |

木蟲 (著名寫手)
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樓主,第一個問題:加入磷酸鹽是對C18柱子有一定的改性作用,增強其分離的能力,及維持流動相在一定的ph環(huán)境中,保持必測物保持在一定分子形態(tài)中,不易發(fā)生離解。 第二個問題:水:乙腈=95:5的話,是不是太傷反相柱了,水相太高會傷柱。峰型不好應該是你流動相的ph值環(huán)境的問題,嘗試加入磷酸鹽調(diào)節(jié)環(huán)境。 第三個問題:這個答案需要視分析情況而定,如果可以加入磷酸、甲酸、乙酸等,也可以。 祝樓主實驗成功~~~~~~~ |
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