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mingfengpbpb木蟲 (正式寫手)
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[求助]
磷酸鹽緩沖液流動(dòng)相 已有2人參與
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1、我在做一個(gè)抗生素的含量測(cè)定，流動(dòng)相是磷酸鹽緩沖液：乙腈88:12，C18柱子，一直不太明白，流動(dòng)相里加鹽的作用是什么？是為了保持PH值不變嗎？ 2、做了兩個(gè)月左右了，柱子就分不開(kāi)峰了，工程師過(guò)來(lái)把填料重新裝了一下，然后我用流動(dòng)相走了幾針標(biāo)品（用水配制的），峰型非常不好，峰面積還很低。然后換用水：乙腈95:5沖柱子，結(jié)果在2min左右出了一個(gè)大峰，隨后我又進(jìn)了一針標(biāo)品，還是用的水：乙腈95:5，結(jié)果在9min出峰，這樣是說(shuō)明流動(dòng)相中乙腈比例太高了嗎？或者是其他的什么原因呢？請(qǐng)各位大神指點(diǎn)，不勝感激。 3、流動(dòng)相帶鹽太傷柱子了，能不能不加鹽呢？ 4、藥典里流動(dòng)相是磷酸鹽：乙腈98:2，當(dāng)時(shí)用這根柱子時(shí)，我是從98:2一點(diǎn)點(diǎn)加大有機(jī)相比例的，為的是把保留時(shí)間提前到合適的位置。 |
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3樓2015-08-06 16:03:46
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
mingfengpbpb: 金幣+2 2015-08-06 15:57:27
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mingfengpbpb: 金幣+2 2015-08-06 15:57:27
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樓主，第一個(gè)問(wèn)題：加入磷酸鹽是對(duì)C18柱子有一定的改性作用，增強(qiáng)其分離的能力，及維持流動(dòng)相在一定的ph環(huán)境中，保持必測(cè)物保持在一定分子形態(tài)中，不易發(fā)生離解。 第二個(gè)問(wèn)題：水：乙腈=95:5的話，是不是太傷反相柱了，水相太高會(huì)傷柱。峰型不好應(yīng)該是你流動(dòng)相的ph值環(huán)境的問(wèn)題，嘗試加入磷酸鹽調(diào)節(jié)環(huán)境。 第三個(gè)問(wèn)題：這個(gè)答案需要視分析情況而定，如果可以加入磷酸、甲酸、乙酸等，也可以。 祝樓主實(shí)驗(yàn)成功~~~~~~~ |
2樓2015-08-06 11:26:38
raulsam1984
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5樓2015-08-07 19:52:52
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