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白色實驗服新蟲 (初入文壇)
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[求助]
測定土壤酶活力過程中的問題 已有3人參與
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小弟最近在測定土壤酶活力，常見的幾種酶。像蔗糖酶（比色法）、脲酶（苯酚鈉-次氯酸鈉比色法）、蛋白酶（茚三酮比色法）、纖維素酶（硝基水楊酸比色法）等…… 但是，在測定蛋白酶的時候出現(xiàn)一系列問題如下： 1：1、蛋白酶測定的時候，實驗組和對照組（無土+無基質(zhì)）全部出現(xiàn)茶色，并沒有出現(xiàn)應(yīng)該出現(xiàn)的藍紫色，做了四次，全部都是茶色，不知道哪里出現(xiàn)問題了； 2、用酪素做基質(zhì)，波長為500nm，用明膠做基質(zhì)，波長為560nm，請問到底波長用多少合適？ 3、培養(yǎng)結(jié)束后，過濾之前還是之后加入沉淀蛋白質(zhì)的試劑，加入后需不需要離心？離心轉(zhuǎn)速多少？離心在過濾之前還是過濾之后好？ 4、沒有離心，培養(yǎng)后直接過濾，過濾速度很慢（超級慢的那一種），這個現(xiàn)象合理不合理，如果不合理，該怎么做？ 5、用酪素做基質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)曲線用甘氨酸繪制？還是酪氨酸繪制？明膠做基質(zhì)曲線用什么繪制呢？（查閱了很多文獻，方法有的各不相同，希望大神解答……） 我用茚三酮比色法（酪素基質(zhì)），測定波長為500nm；加勒斯江法（明膠基質(zhì)），測定波長為560nm；實驗還是不出結(jié)果，希望蟲友幫助，小弟不勝感激…… 在測定纖維素酶活力的時候，出現(xiàn)過濾很慢（無法想象的慢，甚至我懷疑過濾都停止了），不知道離心或者用布氏漏斗可以不可以（今天打算試一下的）……或者蟲友有更好的解決辦法。 第一次發(fā)帖，不便之處請見諒。剛簽到三天，金幣不多……希望大家能幫小弟解決這些問題，在線等。 |
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4樓2015-08-25 16:07:45
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