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白色實(shí)驗(yàn)服新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
測(cè)定土壤酶活力過(guò)程中的問(wèn)題 已有3人參與
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小弟最近在測(cè)定土壤酶活力，常見(jiàn)的幾種酶。像蔗糖酶（比色法）、脲酶（苯酚鈉-次氯酸鈉比色法）、蛋白酶（茚三酮比色法）、纖維素酶（硝基水楊酸比色法）等…… 但是，在測(cè)定蛋白酶的時(shí)候出現(xiàn)一系列問(wèn)題如下： 1：1、蛋白酶測(cè)定的時(shí)候，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組（無(wú)土+無(wú)基質(zhì)）全部出現(xiàn)茶色，并沒(méi)有出現(xiàn)應(yīng)該出現(xiàn)的藍(lán)紫色，做了四次，全部都是茶色，不知道哪里出現(xiàn)問(wèn)題了； 2、用酪素做基質(zhì)，波長(zhǎng)為500nm，用明膠做基質(zhì)，波長(zhǎng)為560nm，請(qǐng)問(wèn)到底波長(zhǎng)用多少合適？ 3、培養(yǎng)結(jié)束后，過(guò)濾之前還是之后加入沉淀蛋白質(zhì)的試劑，加入后需不需要離心？離心轉(zhuǎn)速多少？離心在過(guò)濾之前還是過(guò)濾之后好？ 4、沒(méi)有離心，培養(yǎng)后直接過(guò)濾，過(guò)濾速度很慢（超級(jí)慢的那一種），這個(gè)現(xiàn)象合理不合理，如果不合理，該怎么做？ 5、用酪素做基質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)曲線用甘氨酸繪制？還是酪氨酸繪制？明膠做基質(zhì)曲線用什么繪制呢？（查閱了很多文獻(xiàn)，方法有的各不相同，希望大神解答……） 我用茚三酮比色法（酪素基質(zhì)），測(cè)定波長(zhǎng)為500nm；加勒斯江法（明膠基質(zhì)），測(cè)定波長(zhǎng)為560nm；實(shí)驗(yàn)還是不出結(jié)果，希望蟲(chóng)友幫助，小弟不勝感激…… 在測(cè)定纖維素酶活力的時(shí)候，出現(xiàn)過(guò)濾很慢（無(wú)法想象的慢，甚至我懷疑過(guò)濾都停止了），不知道離心或者用布氏漏斗可以不可以（今天打算試一下的）……或者蟲(chóng)友有更好的解決辦法。 第一次發(fā)帖，不便之處請(qǐng)見(jiàn)諒。剛簽到三天，金幣不多……希望大家能幫小弟解決這些問(wèn)題，在線等。 |
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白色實(shí)驗(yàn)服
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9樓2015-08-29 20:22:40
白色實(shí)驗(yàn)服
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2樓2015-08-25 12:51:38
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autumuer
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