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關(guān)于大腸桿菌誘導(dǎo)表達(dá) 已有2人參與
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用的是pet29b，我的蛋白37度3h誘導(dǎo)后全部是包涵體，很明顯，上清基本無。然后22度誘導(dǎo)11h后沉淀中沒有目的蛋白，上清中少，但比之前要多。這是不是說明，我應(yīng)該在37度和22度之間摸條件呢？還有我聽說低iptg有助于降低包涵體，但是為何我覺得1mM的好像比0.1mM和0.02mM的好像上清中要多一點(diǎn)呢 還有就是，如果大體積誘導(dǎo)，多少升細(xì)菌液合適呢？ 問題比較多，謝謝各位啦  |
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