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[求助]
求助，SDS-page電泳跑不出來(lái) 已有3人參與
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| 各位大神，我是做細(xì)菌蛋白提取的，提取的蛋白用BCA檢測(cè)濃度檢測(cè)的出來(lái)。但是用于跑電泳跑不出來(lái)。我用過(guò)12%，10%，8%的分離膠，marker每次都跑的出來(lái)，但是我的樣品每次都跑不出來(lái)。請(qǐng)問(wèn)是什么原因？BCA測(cè)蛋白濃度測(cè)的出來(lái)能不能證明有蛋白？？？ |
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葉曉波1572
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
蘿卜變青青: 金幣+2, 我提取的總蛋白，應(yīng)該說(shuō)跑出來(lái)的是很多條帶，BCA測(cè)出的蛋白濃度是2mg/ml，上樣buffer是5X,我是稀釋蛋白濃度到1mg/ml，然后取12μl的樣品和3μl的上樣buffer混合，上樣10μl。請(qǐng)問(wèn)會(huì)不會(huì)是我的總蛋白的濃度是1mg/ml，實(shí)際上每種蛋白的含量很少，所以顏色很淺幾乎沒(méi)有呢。 2016-04-11 21:32:11
蘿卜變青青: 金幣+2, 我提取的總蛋白，應(yīng)該說(shuō)跑出來(lái)的是很多條帶，BCA測(cè)出的蛋白濃度是2mg/ml，上樣buffer是5X,我是稀釋蛋白濃度到1mg/ml，然后取12μl的樣品和3μl的上樣buffer混合，上樣10μl。請(qǐng)問(wèn)會(huì)不會(huì)是我的總蛋白的濃度是1mg/ml，實(shí)際上每種蛋白的含量很少，所以顏色很淺幾乎沒(méi)有呢。 2016-04-11 21:32:11
| 樓主提供的信息不明確 你的目的蛋白分子量是多少 BCA測(cè)得的濃度時(shí)多少 你上樣量多少 |
2樓2016-02-23 13:11:56
3樓2016-02-23 23:18:58
denny_125
新蟲(chóng) (初入文壇)
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4樓2016-02-23 23:43:28
star013 
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我們可以把你您做實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)，蛋白表達(dá)純化檢測(cè)這塊還是很不錯(cuò)的 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
5樓2016-02-24 08:24:33
對(duì)木簡(jiǎn)歌
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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6樓2016-03-17 10:55:20
keke226
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【答案】應(yīng)助回帖
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你的樣品是純的目的蛋白嗎？BCA測(cè)的是樣品中總的目的蛋白含量。如果你的樣品沒(méi)有經(jīng)過(guò)純化，很多雜蛋白也會(huì)被算進(jìn)去。另外，BCA法的干擾物質(zhì)有很多，要保證你的樣品里沒(méi)有那些東西測(cè)出來(lái)才準(zhǔn)確。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
7樓2016-03-17 11:49:35
原海亮
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8樓2016-03-17 12:01:12
劉曦lxlx
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9樓2017-12-01 20:06:36
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