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[求助]
求助：PCR擴(kuò)增不出條帶 已有3人參與
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本人新手，最近在擴(kuò)增RNA病毒中的兩段基因分別為VP1和3D，提取的RNA用通用引物反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，用檢測引物可以看出條帶很亮，但用擴(kuò)增基因全長的引物就擴(kuò)不出來了，反轉(zhuǎn)錄引物是用的Oligo dT，也嘗試過自己設(shè)計的下游引物，PCR引物試了好多，酶也換過幾種，退火溫度梯度做過50-60度的，DMSO也試過，本來覺得很簡單的一點實驗一直卡在這不動了，自己都快沒有信心了。求大神們不吝賜教。 30865196.jpg |
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10樓2017-03-09 17:25:40
2樓2017-03-04 15:51:48
xinxiyuzhou
至尊木蟲 (著名寫手)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
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檢測引物是什么鬼？這么短的片段應(yīng)該很容易擴(kuò)出來的，是在做不出來可以用融合PCR，找找相關(guān)的文獻(xiàn)，直接拿別人的條件應(yīng)該可以做的出來 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-03-04 16:15:37
4樓2017-03-04 16:41:58
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