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小朱大寶新蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量PCR 已有2人參與
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| 我們平時一般做熒光定量PCR都是以RNA為起始材料，將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA之后進行PCR操作，但是在一篇關(guān)于端粒長度測定的文獻中，實驗是以基因組DNA為起始材料，直接進行PCR操作。我想請問什么時候可以直接以基因組DNA進行熒光定量，而不需要提RNA，然后反轉(zhuǎn)錄成cDNA再進行熒光定量。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-29 19:25:47
小朱大寶: 金幣+2, ★有幫助 2014-12-30 09:50:26
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小朱大寶: 金幣+2, ★有幫助 2014-12-30 09:50:26
| 我們平時做的定量PCR，目的是為了驗證在干預(yù)前后“可表達(dá)”基因的表達(dá)量的變化，當(dāng)然取材是mRNA，需要反轉(zhuǎn)錄之后才能做PCR。但是你剛才提到的是端粒長度，端粒中的DNA是不表達(dá)的，只要引物設(shè)計合理，完全可以直接用基因組DNA為原料進行PCR�？傊�，不是熒光定量PCR一定要用cDNA，而是取決于你實驗的目的。 |
2樓2014-12-29 13:50:52
chengxiaohua
新蟲 (初入文壇)
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3樓2017-03-19 23:31:11
chengxiaohua
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4樓2017-03-19 23:33:53
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