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574759350鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
單酶切切不開(kāi)的原因？
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| 本人設(shè)計(jì)一對(duì)引物進(jìn)行一段基因的PCR擴(kuò)增，引物兩端分別帶有Nco I和BamH I的酶切位點(diǎn)，將PCR產(chǎn)物膠回收后連接在T載體上然后利用兩個(gè)酶雙酶切，但是電泳圖譜顯示雙酶切結(jié)果跟單酶切圖譜一樣，因此將質(zhì)粒分別利用BamH I和Nco I單酶切，驗(yàn)證是哪個(gè)酶的原因，結(jié)果顯示BamH I切開(kāi)但Nco I未切開(kāi)，因此用Nco I酶切另一含有位點(diǎn)的質(zhì)粒，結(jié)果切開(kāi)了，表明Nco I沒(méi)有失活，這到底是什么原因？難道公司合成的引物有問(wèn)題，Nco I位點(diǎn)突變了？ |
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574759350
鐵蟲 (小有名氣)
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6樓2014-02-11 08:51:57
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3樓2014-02-10 15:26:58
4樓2014-02-10 16:50:00
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