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超級馬力新蟲 (小有名氣)
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最近做原核表達(dá)，蛋白全在在包涵體中，優(yōu)化了條件也不行，怎么辦？ 已有1人參與
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最近用Rosetta菌株表達(dá)一個植物蛋白，使用的是pET28a載體，18度誘導(dǎo)過夜全在包涵體中，通過純化上清，只能拿到很少的蛋白。后來在16度條件下優(yōu)化條件，包括誘導(dǎo)劑的量，誘導(dǎo)時間，加葡萄糖或乙醇。但是沒有效果。請問有經(jīng)驗的高手有什么好的建議嗎？ PS：圖片中是16度優(yōu)化條件的結(jié)果。蛋白大小大概是50kDa。 Administrator 2016-04-22 01hr 25min.jpg Administrator 2016-04-22 01hr 27min.jpg |
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新蟲 (知名作家)
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原海亮
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
超級馬力: 金幣+5, ★★★很有幫助 2016-04-25 10:12:45
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加標(biāo)簽是可以，但是我們通常可以嘗試下其他表達(dá)載體，比如換一些啟動子較弱的載體 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-04-23 21:23:28
空空如也的左
新蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2018-06-15 15:56:50
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